点击图片查看原图
Vanquish超高效液相色谱因其高分辨率、高灵敏度和高速度的特点，广泛应用于化学、制药、生命科学、食品、环境等领域的分析。
使用Vanquish超高效液相色谱（UHPLC）时，用户需要掌握以下几个关键方面：系统安装、操作设置、样品分析以及结果分析。以下是具体使用方法的步骤。
一、Vanquish超高效液相色谱系统准备
在使用Vanquish UHPLC之前，需要确认以下步骤：
1.安装并连接设备：
(1)确保液相色谱系统、检测器、溶剂输送系统、柱温箱等设备已正确安装并连接。
(2)连接合适的液相色谱柱（通常为反相、正相、离子交换、亲和色谱等类型，根据实验要求选择）。
2.溶剂准备：
(1)使用适合实验的高纯度溶剂。确保溶剂过滤和脱气（通过真空或超声波去气）处理，以避免气泡对系统造成影响。
(2)确保流动相的比例与目标分析物的分离需求相符。
3.校准和测试：
(1)使用标准溶液进行系统校准，检查色谱柱的分离能力和检测器的响应。
二、Vanquish超高效液相色谱系统启动
1.开机并预热系统：
(1)打开液相色谱仪的电源，并预热系统至设定温度。通常，Vanquish UHPLC配有自动温控系统，可以设定色谱柱和检测器的工作温度。
(2)在启动时，检查所有连接是否正常，无泄漏。
2.检查泵流量：
(1)确保泵的流量设置正确，通常设置为1 mL/min至5 mL/min之间，具体流速取决于色谱柱和样品的性质。
(2)使用“Prime”功能清洗泵管和注射系统，确保无气泡。
三、设定分析参数
根据实验目标，设置Vanquish UHPLC的各项参数。常见的操作包括：
1.流动相和梯度程序：
(1)设置流动相的组成和梯度程序。流动相的选择取决于目标化合物的性质。
(2)如果进行梯度洗脱，设置初始、梯度上升、稳态流动相的比例和洗脱时间。
2.色谱柱选择和温度控制：
(1)根据样品的化学性质选择合适的色谱柱（例如，C18柱用于反相分离）。
(2)设置色谱柱的温度，通常在30℃至40℃之间，有时根据实验需求调整。
3.检测器设置：
(1)选择合适的检测器（如紫外/可见光检测器（UV/VIS）、荧光检测器、质谱等），并设定检测波长或其他相关参数。
(2)调整检测器的灵敏度和增益，以优化信号响应。
4.注射设置：
(1)配置自动进样器的注射量和频率。注射量取决于样品浓度和分析需求。
四、样品准备与分析
1.样品制备：
(1)根据样品的性质选择合适的溶剂进行溶解。确保样品过滤去除颗粒物，并且溶解度适当。
(2)调整样品浓度，避免过浓导致色谱柱饱和，过稀导致信号过低。
2.注射样品：
(1)使用自动进样器将样品注入色谱系统中，确保注射量精确，避免样品污染。
3.分析过程：
(1)运行色谱分离程序，根据设定的流动相和梯度程序开始分析。
(2)观察色谱图，确认峰形和分离度。
五、结果分析
1.色谱图解读：
(1)分析通过Vanquish UHPLC系统得到的色谱图，识别目标分析物的保留时间、峰面积和峰高。
(2)根据校准曲线计算目标化合物的浓度。
2.数据处理与报告：
(1)使用Thermo Fisher提供的Chromeleon软件或其他兼容软件进行数据分析。该软件可以帮助处理色谱图，进行峰识别，计算浓度，输出实验报告。
六、维护与清洗
1.定期清洗：
(1)定期清洗色谱柱和泵管，避免由于污染或积累的杂质影响系统性能。使用适当的溶剂进行清洗，如乙腈、水或含有酸/碱的溶液。
(2)检查系统管道、泵和注射器是否有泄漏，确保系统的密封性。
2.色谱柱保护：
(1)定期检查色谱柱的性能，建议在高压运行时使用反向流动清洗色谱柱，以延长柱的使用寿命。
3.换液与维护：
(1)定期更换溶剂过滤器、泵头、管道等易损部件。
更多产品信息来源：https://www.chem17.com/st377393/product_29339553.html
Vanquish超高效液相色谱使用方法